(酶活定义):在 25℃及 pH7.0 条件下,以 10mM 底物反应,每 min 消耗 1μmolNAD(P)H 所需的酶量为一个酶活单位(U)。
使用酮还原酶可参考(但不限于)以下反应体系:
1-10mg/ml 底物
10mg/ml 酶粉
10%(v/v) 有机助溶剂
100mM 磷酸盐缓冲液 (pH7.0)
0.2mg/ml NADP+/NAD+
10mg/ml 葡萄糖
2mg/ml 葡萄糖脱氢酶
将反应管置于控温摇床中以一定转速(例如30oC,150rpm)反应24~48小时,对反应液离心取上清液进行TLC、HPLC或GC分析。