通过大肠杆菌重组、表达和纯化而获得.
纯度:未检测到Vaccinia DNA Topoisomerase I活力之外的DNA外切酶、DNA内切酶和RNase活性。
用途:Vaccinia DNA Topoisomerase I可用于解开双链闭合环状DNA的超螺旋结构便于后续的酶切等分子生物学反应、DNA载体和PCR扩增片段之间的连接、缺刻修复和接头连接等。
活性定义:One unit of DNA Topoisomerase I from Vaccinia converts 1 µg of supercoiled closed circular pUC18 DNA to relaxed closed circular form in 30 min at 37°C。
10X Reaction Buffer: 500 mM Tris-acetate, 1M NaCl, 25 mM MgCl2, 1 mM EDTA, pH 7.5 at25°C。
酶储存溶液:50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.1 M NaCl, 0.1% Triton X-100 and 50% (v/v) glycerol
失活或抑制:80℃加热20min可以使Vaccinia DNA Topoisomerase I失活。