介绍:
核酸外切酶I(Exonuclease I)具有从3’-5’方向降解单链 DNA 的外切酶活性,能够逐步释放脱氧核糖核酸5'单磷酸,并留下完整的5'端二核苷酸。该酶来源于携带有E. coli exo I 基因的质粒,经重组表达纯化而得。Exonuclease I多用于PCR扩增后降解消化引物,该酶对于双链DNA和磷酰或乙酰基团封闭的3’OH末端DNA链无活性。
单位定义
1 单位指在 37℃ 条件下,30 分钟内催化释放 10 nmol 的酸溶性核苷释放所需要的酶量。
应用
从PCR混合物中去除引物PCR产物测序之前用于在单管中使用大引物进行的PCR诱变反应从核酸混合物中去除含有3'羟基末端的单链DNA检测含有3'羟基末端的单链DNA的存在
储存
置于-20°C,可保存3年。
使用注意事项
(1)1×ExoI Buffer:67mM Glycine-KOH pH 9.5,6.7mM MgCl2,10mM 2-巯基乙醇。该酶在常规PCR Buffer中也具有活性。
(2)该酶的最佳反应温度为37°C,80°C 20min可失活。
(3)该酶不能切割双链DNA,因此含有二级结构的单链DNA需要变性后才能完全消化。
储存条件: -20°C
用途: 本品仅供科研,不得用于其它用途。